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狂犬疫苗行業(yè)市場(chǎng)規(guī)模 2020狂犬疫苗行業(yè)現(xiàn)狀及發(fā)展前景分析

  • 2020年7月24日 HaoChenChong來源:互聯(lián)網(wǎng) 1155 74
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人二倍體細(xì)胞狂犬病疫苗為凍干粉針劑。我國(guó)自2004 年開始研制人二倍體細(xì)胞狂犬病疫苗,2014 年,我國(guó)首家擁有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的凍干人用狂犬病疫苗上市。 人用精制 VERO細(xì)胞狂犬病疫苗及精制地鼠腎細(xì)胞狂犬病疫苗均為輕度混濁白色液體,長(zhǎng)度超過三十的dsRNA會(huì)引起干擾

人二倍體細(xì)胞狂犬病疫苗為凍干粉針劑。我國(guó)自2004 年開始研制人二倍體細(xì)胞狂犬病疫苗,2014 年,我國(guó)首家擁有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的凍干人用狂犬病疫苗上市。 人用精制 VERO細(xì)胞狂犬病疫苗及精制地鼠腎細(xì)胞狂犬病疫苗均為輕度混濁白色液體,長(zhǎng)度超過三十的dsRNA會(huì)引起干擾素毒性問題是世界性的風(fēng)險(xiǎn) ,久放形成可搖散的沉淀,含硫柳汞防腐劑。該疫苗對(duì)于防止傷口感染具有相當(dāng)好的作用。

根據(jù)中研研究院研究出版的《2020-2025年中國(guó)狂犬疫苗行業(yè)市場(chǎng)前瞻與未來投資戰(zhàn)略分析報(bào)告》統(tǒng)計(jì)分析顯示:

一、中國(guó)狂犬疫苗行業(yè)發(fā)展歷程

我國(guó)1980年前生產(chǎn)和使用的狂犬病疫苗為成年羊腦組織懸液的疫苗,接種后不良反應(yīng)大,特別是由腦組織引起的變態(tài)性腦脊髓炎不良反應(yīng)更為嚴(yán)重,同時(shí)免疫效果也不夠滿意。為解決這些問題,開始研制細(xì)胞培養(yǎng)狂犬病疫苗,有以下兩種類型。

2.1地鼠腎細(xì)胞疫苗

1965年開始由衛(wèi)生部武漢生物制品研究所牽頭,中國(guó)藥品生物制品檢定所、衛(wèi)生部長(zhǎng)春、蘭州生物制品研究所等單位合作,用生產(chǎn)羊腦疫苗的北京株狂犬病固定毒株(1931年從北京病人腦分離的街毒,經(jīng)兔腦傳代適應(yīng)的固定毒)通過原代地鼠腎細(xì)胞適應(yīng)傳代,獲得aG株適應(yīng)株,用該毒種開始生產(chǎn)地鼠腎細(xì)胞疫苗,地鼠腎細(xì)胞疫苗經(jīng)歷過以下幾個(gè)階段的改進(jìn)提高。

2.1.1原制佐劑疫苗用aG株毒種接種地鼠腎細(xì)胞培養(yǎng),培養(yǎng)液經(jīng)福爾馬林滅活后加入Al(OH)3作為佐劑即原制佐劑疫苗。該疫苗在人體與羊腦疫苗進(jìn)行過抗體應(yīng)答比較,結(jié)果顯示該疫苗接種3針的中和抗體水平相當(dāng)于羊腦疫苗連續(xù)注射14針的水平。該疫苗于1980年應(yīng)用并替代了羊腦疫苗。疫苗應(yīng)用十幾年,雖然接種后不再出現(xiàn)腦脊髓炎變態(tài)反應(yīng),但仍發(fā)生一些免疫失敗病例。分析原因與疫苗未經(jīng)濃縮,抗原量偏低有關(guān),實(shí)驗(yàn)室效力檢定效價(jià)一般只在1.3IU,未達(dá)到WHO規(guī)定的每劑量2.5IU的標(biāo)準(zhǔn)。

2.1.2濃縮原制佐劑疫苗為了提高疫苗的效價(jià),衛(wèi)生部于1993年決定生產(chǎn)效價(jià)\2.5IU的濃縮或濃縮純化的佐劑疫苗,以取代普通的未濃縮佐劑疫苗。濃縮疫苗的生產(chǎn)工藝與原制苗類似,只是最后將疫苗原液經(jīng)10萬或30萬分子量截留膜濃縮3~5倍制成。免疫效果明顯提高,全國(guó)狂犬病病例由上世紀(jì)70年代和80年代初的每年數(shù)千例下降到90年代末的200~300例。但由于疫苗未經(jīng)純化含有一定的雜蛋白,大面積接種后雖未發(fā)現(xiàn)神經(jīng)并發(fā)癥病例,過敏反應(yīng)卻時(shí)有發(fā)生,如注射部位疼痛、大面積紅腫、全身性蕁麻疹、過敏性紫癜、血管神經(jīng)性水腫等,個(gè)別出現(xiàn)過敏性休克,神志不清,并有危及生命者。嚴(yán)重不良反應(yīng)發(fā)生率約5%~10%,且這些不良反應(yīng)均需臨床處理才能緩解。分析濃縮疫苗不良反應(yīng)增強(qiáng)的原因,主要是疫苗生產(chǎn)過程中加入異性蛋白如小牛血清、含狂犬病毒的豚鼠腦組織用作毒種和培養(yǎng)病毒的地鼠腎細(xì)胞蛋白。這些本來極微量的雜蛋白經(jīng)濃縮后含量加大,增加了反應(yīng)原含量。陳學(xué)奎等以豚鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型,將地鼠腎細(xì)胞狂犬病濃縮疫苗成品致敏豚鼠后,以疫苗內(nèi)不同成分靜脈注射,結(jié)果證實(shí),地鼠腎細(xì)胞成分是引起過敏的重要物質(zhì),過敏的嚴(yán)重程度隨制品濃縮倍數(shù)的增大而增大。

2.1.3濃縮純化佐劑疫苗鑒于上述原因,國(guó)家藥品監(jiān)督管理局決定盡快生產(chǎn)和使用純化的狂犬病疫苗替代未純化的濃縮疫苗。這種疫苗是在濃縮佐劑疫苗的生產(chǎn)基礎(chǔ)上,對(duì)病毒培養(yǎng)液進(jìn)行濃縮和純化。沈陽安迪生物公司(現(xiàn)大連金港公司)和遼寧生物技術(shù)公司經(jīng)較長(zhǎng)時(shí)間的純化技術(shù)研究并與Pharmacia公司合作,最終采用Sepharose4FF凝膠柱層析技術(shù)純化。純化后病毒回收率達(dá)77.4%,雜蛋白去除率達(dá)99%以上,殘余牛血清<12.5ng/mL,疫苗效價(jià)在7IU/劑以上。也有廠家用DEAESepharoseCL-6B離子交換層析或醋酸鋅沉淀后柱層析技術(shù),再經(jīng)0.22Lm濾膜過濾除菌,加Al(OH)3制成。有的廠家將傳統(tǒng)的福爾馬林滅活病毒改用1B4000的B-丙內(nèi)脂。8個(gè)廠家的8批人體臨床觀察結(jié)果顯示,未發(fā)生中、重度異常反應(yīng)。據(jù)發(fā)熱、紅腫、硬結(jié)、皮疹等指標(biāo)統(tǒng)計(jì),3針和5針免疫的不良反應(yīng)率為0%~9.7%。中和抗體應(yīng)答結(jié)果,按暴露前免疫方案接種,3針后14d抗體陽轉(zhuǎn)均達(dá)100%,抗體滴度GMT為9.8~24.2,按暴露后方案接種5針后的中和抗體,陽轉(zhuǎn)率均達(dá)100%,GMT為5.7~39.8。

但當(dāng)時(shí)沒有要求作暴露初免后10~14d的早期抗體應(yīng)答,所以對(duì)這種疫苗的早期抗體應(yīng)答情況不清,而國(guó)外對(duì)狂犬病疫苗新產(chǎn)品均要求作免疫后不同時(shí)間的抗體動(dòng)態(tài)觀察,特別是早期抗體對(duì)暴露后免疫成功尤其重要。而狂犬病疫苗主要用于暴露后免疫,要求疫苗快速誘生中和抗體以發(fā)揮中和抑制病毒達(dá)到保護(hù)的作用。因此有必要研制無佐劑的純化疫苗。

2.1.4濃縮純化無佐劑疫苗河南普新生物工程有限公司在實(shí)驗(yàn)性疫苗生產(chǎn)中,將同批疫苗原液制成加和未加Al(OH)3佐劑的兩種疫苗。用無佐劑疫苗和佐劑疫苗各1批(效價(jià)均為4.2IU/mL)進(jìn)行人體反應(yīng)性和免疫性觀察比較。結(jié)果表明,兩種疫苗的不良反應(yīng)均很輕,但在局部不良反應(yīng)上無佐劑純化苗低于佐劑純化苗。兩種疫苗的抗體應(yīng)答,由檢定所作中和效價(jià)測(cè)定,結(jié)果所有志愿者免疫前的抗體均為陰性,在首次免后7d時(shí),佐劑苗37人中僅3人抗體陽轉(zhuǎn)(\0.5IU),陽轉(zhuǎn)率8.1%,而無佐劑苗31人中陽轉(zhuǎn)14人,陽轉(zhuǎn)率45.2%;在免后14d時(shí)佐劑苗陽轉(zhuǎn)率59.5%,無佐劑苗為100%;在免后45d時(shí)佐劑苗和無佐劑苗的陽轉(zhuǎn)率均為100%。結(jié)合近年來發(fā)現(xiàn)純化佐劑疫苗接種后免疫失敗病例較多,出現(xiàn)一些潛伏期短的免疫失敗病例,可能與佐劑疫苗抗體產(chǎn)生緩慢,得不到及時(shí)保護(hù)有關(guān)。參考國(guó)際上所有暴露后免疫用疫苗都是不加佐劑的疫苗,中檢所多次提出并已經(jīng)國(guó)家藥品監(jiān)督管理局的同意,生產(chǎn)無佐劑的狂犬病疫苗。無佐劑純化疫苗的生產(chǎn)工藝與佐劑疫苗相似,只是在最后階段,疫苗內(nèi)不加Al(OH)3佐劑,加適當(dāng)穩(wěn)定劑后制成。根據(jù)不同廠家的無佐劑疫苗臨床觀察,不良反應(yīng)較以往的佐劑疫苗輕,在初免后14d中和抗體都能100%陽轉(zhuǎn)。

2.2Vero細(xì)胞狂犬病疫苗的發(fā)展

近年來,我國(guó)已研制成功以Vero細(xì)胞為基質(zhì)的純化狂犬病疫苗。Vero細(xì)胞由中國(guó)藥品生物制品檢定所從美國(guó)ATCC引進(jìn),細(xì)胞代次在126左右。用于生產(chǎn)Vero細(xì)胞疫苗的毒種,經(jīng)國(guó)家藥品管理局批準(zhǔn)的有2株,1株為生產(chǎn)地鼠腎細(xì)胞疫苗的aG株,另1株為CTN-1株。

2.2.1CTN-1株Vero細(xì)胞疫苗CTN-1疫苗株由中國(guó)藥品生物制品檢定所建株和保存。原始病毒1956年分離自山東省淄博市死于狂犬病病人的腦組織,病毒經(jīng)小白鼠腦內(nèi)連續(xù)傳56代后,檢定證實(shí)為狂犬病固定毒,又經(jīng)人二倍體細(xì)胞KMB-17株連續(xù)傳50代以上即CTN-1株。CTN-1株經(jīng)全面檢定未發(fā)現(xiàn)外來病毒污染,抗原性與固定毒一致,并具有良好的免疫原性。CTN-1株于1983年和2005年經(jīng)WHO狂犬病專家委員會(huì)確認(rèn)為符合要求的狂犬病疫苗生產(chǎn)用毒種。

李宏玲等用CTN42代和CTN103代毒種在Vero細(xì)胞培養(yǎng)中適應(yīng)傳代,病毒傳至8代后滴度均有顯著上升,傳至17代仍穩(wěn)定在較高水平上,表明CTN株可以在Vero細(xì)胞培養(yǎng)內(nèi)適應(yīng)達(dá)到較高滴度的病毒量,適用于疫苗生產(chǎn)。董關(guān)木等進(jìn)一步證實(shí)CTN株可在Vero細(xì)胞培養(yǎng)內(nèi)快速適應(yīng),滴度達(dá)到7.0log/mL以上并可多次收獲病毒培養(yǎng)液。桑愛軍等用小鼠試驗(yàn)還證明CTN-1制備的疫苗對(duì)1992年國(guó)內(nèi)分離的狂犬病街毒(SBDO7株)具有良好的保護(hù)作用,腦內(nèi)或肌內(nèi)攻擊保護(hù)效果可達(dá)到88.9%和90.0%,表明CTN-1株的抗原性與國(guó)內(nèi)的狂犬病流行株一致,免疫原性高,適用于狂犬病疫苗的生產(chǎn)。

沈陽安迪生物公司和遼寧生物技術(shù)公司從檢定所獲得CTN-1毒種后,在Vero細(xì)胞適應(yīng)10~15代后,用于疫苗生產(chǎn)。張玉慧等還將CTN株適應(yīng)地鼠腎細(xì)胞,用同批地鼠腎細(xì)胞制備aG株和CTN株疫苗各3批,并進(jìn)行NIH效力試驗(yàn)和免疫豚鼠后中和抗體水平的比較,結(jié)果兩項(xiàng)試驗(yàn)CTN株制備的疫苗均高于aG株制備的疫苗。

目前已有多家應(yīng)用CTN-1株生產(chǎn)Vero細(xì)胞疫苗并取得生產(chǎn)文號(hào)。

2.2.2aG株Vero細(xì)胞疫苗國(guó)內(nèi)李宏玲、曾蓉芳、顧悅翔等都曾經(jīng)用aG株在Vero細(xì)胞培養(yǎng)內(nèi)適應(yīng)傳代,表明經(jīng)傳代后病毒滴度可以提高,達(dá)到疫苗生產(chǎn)水平。用aG株適應(yīng)Vero細(xì)胞制備滅活疫苗,其生產(chǎn)工藝與地鼠腎細(xì)胞純化疫苗相似,1999年開始已有多家取得生產(chǎn)文號(hào)和生產(chǎn),但都是加佐劑液體劑型。2003年以來已有一些廠家開始研制純化無佐劑疫苗并取得生產(chǎn)文號(hào)或完成臨床觀察。上海生物制品研究所用生物反應(yīng)器微載體細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)的無佐劑疫苗已完成臨床觀察。

除應(yīng)用以上2株毒種生產(chǎn)的Vero細(xì)胞疫苗外,近年來遼寧成大生物技術(shù)有限公司引進(jìn)國(guó)外的巴斯德PV毒種,利用生物反應(yīng)器,高密度微載體細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)研制成功無佐劑Vero細(xì)胞疫苗。與法國(guó)維爾博進(jìn)口疫苗對(duì)比觀察,未顯示差別,表明該疫苗亦具有良好的安全性和免疫原性。

狂犬病抗血清的發(fā)展

狂犬病抗血清種類按其來源分為動(dòng)物源(主要是馬)與人源血清。狂犬病馬免疫血清為異源性血清,雖然來源方便,經(jīng)濟(jì),可大量生產(chǎn),但使用后不良反應(yīng)高。

20世紀(jì)80年代末由瑞士血清研究所和法國(guó)Merieux公司采用胃蛋白酶酶切精制技術(shù),將無中和活性的Fc段切除,然后經(jīng)鹽析等純化保留具有中和活性的F(abc)2段,生產(chǎn)一種精制抗狂犬病馬血清球蛋白(ERIG),據(jù)調(diào)查引起過敏反應(yīng)的發(fā)生率僅為2.85/10萬,血清病不良反應(yīng)率<2.0%。為進(jìn)一步減少ERIG的不良反應(yīng)和去除馬病菌的污染,近年來法國(guó)巴斯德研制一種經(jīng)過柱層析純化和60e熱滅活10h的新產(chǎn)品稱PHT-ERIG,得到更高的純化IgGF(abc)2片斷產(chǎn)品,應(yīng)用后不良反應(yīng)更低。

我國(guó)早期生產(chǎn)和使用的馬免疫血清,由于技術(shù)和設(shè)備條件限制,產(chǎn)品純度不夠,注射后不良反應(yīng)較大,難于廣泛應(yīng)用。近年來生產(chǎn)技術(shù)作了較大改進(jìn),除采用蛋白酶酶切技術(shù)去除Fc外,在純化上有的廠家也采用層析技術(shù),使純度和活性均較大提高,蛋白含量[170g/L,與國(guó)外產(chǎn)品相同;F(abc)2含量達(dá)到\60%,但較國(guó)外的\75%低。近年來在國(guó)內(nèi)已廣泛應(yīng)用,除個(gè)別外不良反應(yīng)較少發(fā)生。

人源狂犬病球蛋白(HRIG)早在20世紀(jì)70年代由Bayer廠和Merieux廠用HDCV免疫志愿者的血漿制備。該產(chǎn)品經(jīng)人群應(yīng)用后除偶而發(fā)生局部疼痛和低熱外,無血清病或其他不良反應(yīng)發(fā)生。但由于生產(chǎn)過程中使用HDCV價(jià)格高,供血員的來源以及抗體滴度要求高(15IU/mL)等困難,該產(chǎn)品的最終價(jià)格高,因而產(chǎn)量低。國(guó)內(nèi)有深圳衛(wèi)武光明生物技術(shù)公司和武漢生物制品研究所等企業(yè)的產(chǎn)品正廣泛應(yīng)用,并取得效果顯著,不良反應(yīng)少的滿意結(jié)果。但由于價(jià)格較高,對(duì)收入低者仍然難于承受,有待進(jìn)一步研究降低生產(chǎn)成本和價(jià)格。

我國(guó)當(dāng)前生產(chǎn)的人用地鼠腎細(xì)胞和Vero細(xì)胞疫苗的近期效果和接種后的安全性已接近國(guó)外的狂犬病疫苗,但還存在以下差距:①當(dāng)前大多數(shù)國(guó)產(chǎn)疫苗仍然是液體劑型,液體疫苗在保存、運(yùn)輸過程中容易影響疫苗效價(jià);②疫苗質(zhì)量不夠穩(wěn)定,疫苗在申報(bào)臨床的人體觀察中,一般都較滿意,但在以后的投產(chǎn)和市場(chǎng)實(shí)際應(yīng)用中,經(jīng)常發(fā)現(xiàn)疫苗質(zhì)量差,效價(jià)達(dá)不到質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),可能與大規(guī)模生產(chǎn)的技術(shù)還存在問題或質(zhì)量控制不嚴(yán)或疫苗穩(wěn)定性差等有關(guān);③有資料表明,國(guó)外幾種疫苗的免疫持久性在全程免疫后,加強(qiáng)1針可以達(dá)到5~10年,而國(guó)產(chǎn)疫苗的免疫持久性尚無資料,對(duì)再暴露后的人接種程序難于確定。

最近幾年對(duì)國(guó)內(nèi)自然界分離的狂犬病野毒株的基因序列分析發(fā)現(xiàn),不同地區(qū)的野毒株間核苷酸和氨基酸序列有明顯差異,約相差10%,特別是發(fā)現(xiàn)野毒株與現(xiàn)在用于疫苗生產(chǎn)的毒株間的糖蛋白基因也有較大差異,如aG株與上海株SBDO7的核苷酸和氨基酸同源性為85.8%~88.5%,與廣西、寧夏分離的3株狂犬病野毒株的核苷酸同源性只有81.9%~82.7%,氨基酸同源性89.9%~90.5%;CTN株與這3株的同源性,分別為85.9%~92.5%和92.4%~93.5%,高于aG株與其他野毒株的同源性,由于糖蛋白基因與免疫原性密切相關(guān),因此有必要深入研究當(dāng)前生產(chǎn)用毒株與野毒株間的抗原性關(guān)系和不同疫苗對(duì)野毒株的免疫保護(hù)程度。

二、中國(guó)狂犬疫苗發(fā)展?fàn)顩r

1、狂犬疫苗行業(yè)發(fā)展規(guī)模

寵物數(shù)量的增加,帶動(dòng)了狂犬疫苗行業(yè)的發(fā)展規(guī)模。截止2017年,狂犬疫苗行業(yè)市場(chǎng)規(guī)模達(dá)到47.4億元,隨著“假疫苗”事件的發(fā)酵,市場(chǎng)的整頓與調(diào)節(jié)不斷深入,預(yù)計(jì)2018年,狂犬疫苗行業(yè)不會(huì)出現(xiàn)大幅度的增長(zhǎng),行業(yè)市場(chǎng)規(guī)模約為48.3億元。

圖表:2016-2018年我國(guó)狂犬疫苗行業(yè)發(fā)展規(guī)模

數(shù)據(jù)來源:國(guó)家統(tǒng)計(jì)局、中研普華產(chǎn)業(yè)研究院

2、狂犬疫苗行業(yè)供需狀況

近年來,國(guó)內(nèi)狂犬疫苗每年的批簽發(fā)總數(shù)量維持在6000-8000萬支,即1200-1600萬人份,市場(chǎng)使用量較大。目前,Vero細(xì)胞純化狂犬疫苗仍是國(guó)內(nèi)使用的主流疫苗,2017年市占比(數(shù)量)約90%,人二倍體細(xì)胞狂犬疫苗由于產(chǎn)能問題,2017年僅批簽發(fā)99.5萬支。以批簽發(fā)數(shù)量為口徑,根據(jù)各年各種類狂犬疫苗的采購(gòu)均價(jià)計(jì)算,近年來國(guó)內(nèi)狂犬疫苗年產(chǎn)值維持在30-50億元之間,2017年位列國(guó)內(nèi)疫苗之首,市場(chǎng)空間巨大。

圖表:2016-2018年狂犬疫苗行業(yè)批簽發(fā)總數(shù)量

數(shù)據(jù)來源:國(guó)家統(tǒng)計(jì)局、中研普華產(chǎn)業(yè)研究院

想要了解更多狂犬疫苗行業(yè)詳細(xì)分析,請(qǐng)關(guān)注中研研究院研究出版的《2020-2025年中國(guó)狂犬疫苗行業(yè)市場(chǎng)前瞻與未來投資戰(zhàn)略分析報(bào)告》


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